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產品名稱:

huh-7.5.1 人肝癌細胞/STR鑒定

產品型號: huh-7.5.1
產品時間: 2023-06-05
描述:huh-7.5.1 人肝癌細胞/STR鑒定/賽百慷(iCell)
huh-7.5.1 人肝癌細胞介紹
1) 來源:肝癌
2) 形態:上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
6) 準備DMEM培養基;優質胎牛血清,10%;NEAA,1%;雙抗,1%。

產品介紹

huh-7.5.1 人肝癌細胞/STR鑒定/賽百慷(iCell)介紹

1) 來源:肝癌

2) 形態:上皮細胞樣,貼壁生長

3) 含量:>1x106 個/mL

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:

(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發現污染,請及時拍照與我們聯系。

 

細胞用途:僅供科研使用。

huh-7.5.1 人肝癌細胞/STR鑒定/賽百慷(iCell)接受后的處理:

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養基,添加6ml新的*培養基。

4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。

5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。

 

細胞培養步驟

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM培養基;優質胎牛血清,10%;NEAA,1%;雙抗,1%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續傳代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。

細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。

下面T25瓶為例;

1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。

3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

賽百慷(上海)生物技術股份有限公司主要產品和技術服務:

一、原代細胞服務
       各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源;
       多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
       原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等;
       原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務;

二、細胞株/系服務
       細胞株/系培養、增殖、凍存和相關說明書;
       細胞系培養過程的技術指導;
       細胞系培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等;

三、iPS細胞
       iPS細胞基礎培養(有滋養層or無滋養層在);
       iPS細胞增殖及冷凍保存;
       iPS基礎培養技術實習;
       新藥及實驗儀器上市前評估;

四、技術外包服務:各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等

五、其他:根據客戶需要定制服務等

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